固真方对老年大鼠胸腺三碘甲状腺原氨酸(T_3)受体、Na~ -K~ -ATP酶等作用的研究

本研究观察了补肾益精方药固真方对老年大鼠胸腺重/体重比值,老年大鼠胸腺细胞三碘甲状腺原氨酸(T_3)受体数、Na~ -K~ -ATP酶活性以及下丘脑、血浆亮氨酸脑啡肽(L-EK)含量的影响。结果表明:老年大鼠胸腺重/体重比值,胸腺细胞T_3受体数、Na~ -K~ -ATP酶活性以及血浆亮氨酸脑啡肽(L-EK)含量均明显低于青年对照鼠,下丘脑L-EK含量则显著高于青年对照鼠,而固真方能明显改善老年大鼠胸腺三碘甲状腺原氨酸(T_3)受体、Na~ -K~ -ATP酶活性的改变,提示固真方可能通过增加老年大鼠降低的胸腺细胞T_3受体数和提高胸腺摄取T_3的功能,从而增强甲状腺激素(T_3)对胸腺的促进作用,提高老年机体胸腺依赖性免疫功能。     

调心方对Aβ大鼠痴呆模型脑组织IL-1β、IL-6及APPmRNA表达的影响

目的 探讨中药治疗Alzheimer型痴呆(AD)的有效方剂调心方的神经免疫调节作用机制。方法 采用免疫组化、RT-PCR方法分别研究了侧脑室注射β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)诱导的AD大鼠模型神经免疫学病理变化。主要包括脑组织中胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达及炎性细胞因子白细胞介素-β3(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA和AB前体BAPPmRNA基因表达水平,并观察调心方的作用。结果 Aβ在脑组织的沉积能诱导星形胶质细胞的激活以及炎性细胞因子IL-1β、IL-6mRNA水平异常增高,APPmRNA水平也明显提高;而调心方能有效控制以上病理变化。结论 调心方能有效地控制Aβ启动的炎症和免疫级联反应,提示有效控制AD患者脑内Aβ免疫级联反应是调心方的重要作用机制之一。     

补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用

目的：比较补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用。方法：采用上述4种不同的含药血清对衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞2Bs细胞株进行处理,通过细胞寿命实验、流式细胞仪、RT—PCR、Westemblot方法研究不同中药对衰老细胞周期及其相关基因(P16^INK4、Cyclin D1及PCNA)的mRNA转录和蛋白表达的影响。结果：补肾、益气中药对衰老细胞周期有一定的促进作用,并可下调衰老细胞增殖抑制基因P16和周期蛋白Cyclin D1的mRNA／蛋白表达;上调细胞周期促进增殖基因PCNAmRNA／蛋白的表达。而健脾、活血中药对细胞周期及其相关基因和蛋白表达的作用不明显。结论：补肾、益气方药对细胞周期有促进作用,其中的作用可能是通过促进P16途径的基因表达来实现。     

固真方对老年大鼠免疫调节作用机理的研究

本文是在肯定补肾益精固真方能改善老年大鼠免疫功能的基础上,进一步联系血清DHEA(S)的变化观察该方提高老年大鼠脾脏IL-2的免疫调节机理。脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)是人体内含量丰富的一种甾体激素。文献报道脱氢表雄酮具有免疫调节的作用。补肾方药调节老年机体免疫功能的机理是否与脱氢表雄酮有关,至今国内外尚未见报道。为此本课题拟联系血清DHEA探索固真方延缓免疫功能衰老的作用机理。     

益心口服液预处理对急性心肌缺血大鼠CEC、血浆ET、CGRP及心肌病理形态学的影响

目的 研究益心口服液预处理对急性心肌缺血大鼠心血管的保护作用。方法 设假手术组、模型对照组、维拉帕米组、益心口服液组,建立急性心肌缺血模型。造模后2h时采血测血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、循环内皮细胞(CEC)计数,并进行心肌病理形态学观察。结果 益心口服液和维拉帕米均可降低急性心肌缺血大鼠血浆ET(P<0.05)和CEC(P<0.01)水平,减轻心肌病理形态学改变。维拉帕米组血浆CGRP低于模型对照组(P<0.05).益心口服液组和维拉帕米组间上述三指标无显着性差异。结论 益心口服液预处理可减轻心肌及血管内皮细胞损伤,调节急性心肌缺血时所发生的ET、CGRP分泌失衡。     

肥大细胞功能对针刺大鼠"足三里"镇痛效应的影响

目的:观察穴位肥大细胞与针刺效应之间的关系。方法:SD大鼠48只,随机分为正常对照组、穴位针刺组、旁开针刺组、色甘酸钠组、生理盐水组、色甘酸钠 针刺组、生理盐水 针刺组和色甘酸钠 对侧针刺组。采用大鼠尾部痛阈作为效应指标,在体观察针刺“足三里”提插捻转30 min过程中大鼠的甩尾潜伏期;并通过穴位组织切片染色,离体对照针刺前后穴位处局部肥大细胞脱颗粒率的变化,以及色甘酸钠注射对其的影响。结果:手针大鼠“足三里”穴具有显著镇痛作用,效果明显优于针刺旁开对照点;而在色甘酸钠屏蔽穴位肥大细胞的脱颗粒功能后,这种镇痛作用被明显地削弱。针刺后穴位处局部肥大细胞脱颗粒率显著提高;而注射色甘酸钠可以明显减少该脱颗粒现象。结论:穴位组织中的肥大细胞在针刺镇痛效应的产生过程中起着重要作用,肥大细胞脱颗粒参与了针刺镇痛效应的产生过程。     

固真方对UMR106成内样细胞蛋白激酶活性的影响

探讨中药固真方对细胞信号体系中蛋白激酶活性的影响。结果：表明经固真方处理的大鼠UMR106成骨样细胞的蛋白激酶A、蛋白激酶C以及酪氨酸蛋白激酶活性均有增高,分别为对照组的137．5％、362．4％及202．6％（P＜0．01或P＜0．05）。提示：固真方可活跃和增进细胞的信号转导,这可能是其促细胞增殖的一种机制。     

固真方对老年大鼠下丘脑——垂体——甲状腺——胸腺轴作用的研究

老年大鼠下丘脑-垂体-甲状腺-胸腺轴明显老化,而固真方能不同程度地改善该轴的各项指标,提示团真方能多层次、多环节改善老年机体胸腺神经内分泌网的功能,以延缓机体衰老,这充分体现了中医药的整体调节特点。     

中药调心方对氧化损伤型类Alzheimer病大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响

目的 观察调心方对氧化损伤型类A1zheimer病(AD)大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响。方法 采用二羟延胡索酸(DHF） FeCl3 ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD大鼠模型。Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力；C1ark氧电极法观察脑皮层线粒体呼吸链氧化酶活性；原位杂交法观察脑皮层线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基(COⅡ)mRNA表达；Fura 2／AM—荧光法测定脑皮层和海马Ca^2 含量以及调心方对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果 与正常对照组比较,AD模型大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性和皮层COⅡ mRNA表达明显降低，皮层和海马神经元内Ca^2 含量显著增高；调心方对上述各项指标有不同程度的改善作用.结论 调心方具有改善AD大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性、皮层COⅡ mRNA表达和钙稳态失衡的作用。     

左归丸、右归丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类神经递质含量变化的影响

目的:观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类神经递质Asp、Glu、Gly、GABA含量变化的影响,探讨老年机体神经元的神经递质的变化,以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退化的作用机制.方法:以自然衰老大鼠为动物模型,随机分为青年对照组、老年对照组、老年左归丸组、老年右归丸组.采用HPLC-荧光法,检测各组大鼠海马、杏仁核Asp、Glu、Gly、GABA含量变化.结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠海马、杏仁核 Asp、Glu、Gly、GABA含量有不同程度升高,而与老年对照组相比,两用药组含量有不同程度降低.结论:左归丸、右归丸通过纠正老年大鼠海马和杏仁核脑区氨基酸类神经递质的紊乱状态,使兴奋性和抑制性氨基酸这两大类递质最终趋向平衡,从而有助于改善大脑边缘系统,延缓机体衰老.